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本药最初是由印度生物化学家Yellapragada Subbarao在1947年合成出来，他的大部分职业生涯都在美国。之后由美国儿科医生西德尼·法伯 (Sidney Farber)开始使用于癌症的临床治疗，因为其毒性较当时的其他药物低。1950年代，本药开始取代毒性更强的抗叶酸药物Aminopterin，于1956年时已用来作为转移性癌症的第一线治疗药物。本药现已列载于世界卫生组织基本药物标准清单上，代表其是医疗系统所需最有效且安全的药物之一，现今市面上也有其他的学名药 。2014年开发中国家中一日所需口服形式氨甲蝶呤批发价介在0.06美元到0.36美元之间。在美国，一个月的氨甲蝶呤治疗费用大约为25美元至50美元。
本药是目前最重要的控制抗类风湿性关节炎 (rheumatoid arthritis，RA)的药物之一，属于Disease-modifying antirheumatic drug(DMARDs)，其药理为减轻部份白血球（抗体）的炎症活动，进一步阻慢骨骼的损害。
本药仅可由对于抗代谢疗法具有知识及经验之医师使用。高剂量治疗恶性疾病曾有死亡之报告。
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保罗费拉拿是在2002年以200万欧元从一家名为塞图巴尔的葡萄牙球会转会至葡超劲旅波图。2003年，保罗费拉拿替波图夺得葡超、葡萄牙杯冠军，以及欧洲足协杯冠军。
费拉拿凭以出色的防守，为波图赢得2004年欧冠杯冠军。2005年，锐意增兵的英超新兴冠军车路士以1320万英镑签入保罗费拉拿，成为车路士葡籍领队摩连奴的核心人物。结果加盟后首两季他协助球会连赢两届英超冠军：首一季以破英超联赛积分纪录赢得，翌季更首两个月抛离其他对手卫冕成功。
06/07年球季，由于车路士后防受伤患问题困扰，保罗费拉拿曾串演左闸及中坚，惜效果不及其队友艾辛移任后防般理想。
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